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Após a morte de Alphonse (1468), possivelmente devido a envenenamento, Isabel foi instada pelos nobres a se proclamar rainha. As diferenças entre Isabel e o seu irmão Henrique foram resolvidas pelo 'Tratado de Guisando' assinado em 19 de Setembro de 1468 no sítio histórico dos Touros de Pedra de Guisando. De acordo com as condições deste tratado, Isabel foi proclamada Princesa das Astúrias, enquanto o seu irmão, o Rei Henrique, manteve o privilégio de dar a sua aprovação ao pretendente escolhido para Isabel.

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